血细胞分析常见干扰因素及处理方式
血细胞分析仪是临床检验最常用的仪器之一。血细胞分析仪的应用,不但提高了工作效率和质量,而且为临床提供了更多具有临床价值的参数,对疾病的诊断治疗有着重要的意义。现在广泛应用临床的电阻抗法血细胞分析仪在细胞检测的过程中仍存在某些局限性,在实际工作中常常会受到一些异常因素的干扰。在此主要讨论血细胞分析过程中标本自身的干扰因素及纠正措施,以确保我们检测结果的准确、可靠。常见的干扰因素如下。
1.受干扰常见因素
1.1冷凝标本:冷凝集素病是免疫球蛋白M(IgM)抗体引起的自身免疫病。其特点是在较低的温度下,某些疾病患者自身的红细胞与这种抗体发生凝集。血液冷凝集对红细胞计数及其各项参数的检测都能造成很大影响。研究表明,冷凝集素可以导致WBC、MCV假性增高,RBC、HCT、PLT假性减低,特别是RBC、HCT降低尤为显著,但RBC、HB、HCT 3个参数结果之间的关系明显不符,并由此造成MCH、MCHC等计算结果异常增高[1]。纠正措施:将标本放入37℃水浴箱30min ,立即上机检测,各个参数基本恢复正常。
1.2脂血标本:脂血是最常见的干扰因素。由于血红蛋白检测原理是比色法,引起血清浊度增大的因素(如高脂血症、异常血浆蛋白质、WBC>50*109/L等)都可导致其假性增高,进而引起MCH、MCHC显著增加。处理方法:缓慢离心,吸取血浆加入等量的稀释液。
1.3免疫球蛋白的干扰:巨球蛋白血症和多发性骨髓瘤时血浆中IgM 增高,高浓度的免疫球蛋白干扰了溶血剂的作用,引起MCHC假性增高。解决办法:稀释样本或吸取血浆加入等量的稀释液。
1.4溶血标本:正常血清中游离血浆血红蛋白正常参考范围为:10-40mg/L,与红细胞内的血红蛋白一起检测时,不会引起红细胞内的血红蛋白增高。但在病理情况下,某些伤害(如毒蛇咬伤后)诱发的弥漫性血管内凝血(DIC)、药物、输血或采血不顺利等因素可引起标本溶血,血浆游离血红蛋白增加,可使MCHC假性增高,RBC明显减少。纠正措施:观察血涂片是否有较多RBC碎片,或与临床联系,重新采集标本。
2.WBC常受的干扰因素
2.1有核RBC:由于正常情况下RBC的数量约是WBC的1000倍,会引起白细胞总数和淋巴细胞总数及其比例显著假性增高[2]。特别在某些疾病如溶血性贫血时,外周血中可出现大量有核RBC,它不能被稀释液破坏,而使WBC计数偏高。部分五分类血细胞分析仪会提示有核RBC存在,部分五分类仪器(迈瑞BC-6800/6900等)也会计数有核RBC并自动校正而直接给出准确的WBC计数结果[3]。纠正措施:手工分类计数100个WBC遇到的有核RBC数,依据WBC校正公式进行计算
2.2巨大PLT标本:某些血液系统疾病患者血液中可能出现与WBC大小相同的巨大PLT,这些巨大PLT被当作WBC计数,使WBC假性增高。纠正措施:用手工方法对WBC进行计数。
2.3难溶血或溶血不良标本:严重肝病患者由于RBC膜抗溶性增强。纠正方法:采用手工方法计数WBC;用某些不受干扰的仪器检测,排除干扰。
2.4高浓度胆红素:高浓度胆红素影响WBC的计数和分群。在游离胆红素为192.1μmol/L时,对WBC的计数和分群影响很小,256.1μmol/L时影响显著,384.1μmol/L时对WBC的计数影响显著,仪器无法分群[4]。纠正方法:采用手工方法计数WBC。
3.PLT常受的干扰因素
3.1小细胞性贫血标本:缺铁性贫血、地中海贫血等患者的小细胞对某些仪器PLT的计数有明显干扰。一般电阻抗法血液分析仪将30-36fL的颗粒或到60fl(部分光学法仪器)的颗粒设置为PLT。电阻抗法血细胞分析仪,仅能识别颗粒大小,不能区分颗粒性质。当MCV<70fl时,血细胞分析仪的PLT计数容易受小细胞的干扰而假性增高。一些高档血细胞分析仪可以抗小红细胞的干扰。主要是这些仪器采用了光学法的流式细胞学计数原理检测PLT纠正措施:用微镜重新计数PLT或者采用光学法流式血细胞分析仪检测血小板。
3.2 PLT聚集:①采血不顺利时引起血小板破坏和聚集,可使血小板计数假性降低。措施:重新采集血液或者手工方法计数PLT。②EDTA-K2抗凝,PLT形态逐渐变为球形,体积增大,且可引起PLT聚集。造成血分析仪不能辨认,引起PLT假性减少。措施:用不含EDTA抗凝剂稀释液立即稀释标本或显微镜重新计数PLT,同时要观察血涂片是否有PLT集聚。
3.3PLT卫星现象:由EDTA抗凝剂诱导引起的PLT围绕在中性粒细胞或淋巴细胞/淋巴瘤细胞周围,形成卫星现象。一般引起PLT中度减少。克服办法:立即稀释标本检测。
3.4细胞碎片:血细胞分析仪不能完全将PLT与其他类似大小物质,如红细胞碎片或白细胞碎片、灰尘等区别,引起PLT假性增高。纠正方法:用显微镜手工计数PLT。
4.其他
微生物包括细菌、真菌、疟原虫等也会干扰WBC、PLT检测。
脑电图机厂家综上所述,由于某些疾病的原因,造成血液标本性质的改变。血液分析仪在血细胞检测的过程中,常受标本自身的干扰因素是不可忽视的。这就要求检验人员要从中找到正确的解决办法,力求结果准确,为临床提供一个可靠的诊断依据。